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国家标准:食品中蔗糖的测定方法

2015-04-21 来源:121健康网
  
  3 试剂
  
  3.1 组合试剂盒
  
  1号瓶:内含β-果糖苷酶(fructosidase)400U(活力单位)、柠檬酸、柠檬酸三钠;
  
  2号瓶:内含 0.2mol/L 磷酸盐缓冲液 (pH=7.6) 200mL,其中含 4 -氨基安替比
  
  林0. 00154mol/L;
  
  3号瓶:内含 0.022mol/L苯酚溶液200mL;
  
  4号瓶:内含葡萄糖氧化酶(glucose oxidase)800U(活力单位)、过氧化物酶(辣根,
  
  peroxidase)2000U(活力单位)。
  
  1、2、3、4号瓶须在4℃左右保存。
  
  3.2 酶试剂溶液
  
  3.2.1 将1号瓶中的物质用重蒸馏水溶解,使其体积为66mL,轻轻摇动(勿剧烈摇动),使
  
  酶完全溶解。此溶液即为β-果糖苷酶试剂,其中柠檬酸(缓冲溶液)浓度为0.1mol/L,
  
  pH=4.6。在4 ℃左右保存,有效期一个月。
  
  3.2.2 将2号瓶与3号瓶中的溶液充分混合。
  
  3.2.3 将4号瓶中的酶溶解在3.2.2混合液中,轻轻摇动(勿剧烈摇动),使酶完全溶解,
  
  即为葡萄糖氧化酶-过氧化物酶试剂溶液。在4℃左右保存,有效期一个月。
  
  3.3 0.085mol/L亚铁氰化钾溶液
  
  称取3.7g亚铁氰化钾[K4Fe(CN)6?3H2O,GB1273,分析纯],溶于100mL 重蒸馏水中,
  
  摇匀。
  
  3.4 0.25mol/L硫酸锌溶液
  
  称取7.7g硫酸锌(ZnSO4?7H2O,GB666,分析纯),溶于100mL重蒸馏水中,摇匀。
  
  3.5 0.1mol/L氢氧化钠溶液
  
  称取0.4g氢氧化钠(GB629,分析纯),溶于100mL重蒸馏水中,摇匀。
  
  3.6 蔗糖标准溶液
  
  称取经100±2℃烘烤2h的蔗糖(HG3-1001,分析纯)0.4000g,溶于重蒸馏水中,定容
  
  至100mL, 摇匀。将此溶液用重蒸馏水稀释V10.00 -->V100,即为400μg/mL蔗糖标准
  
  溶液。
  
  4 仪器和设备
  
  实验室常规仪器及下列各项:
  
  4.1 研钵或粉碎机。
  
  4.2 分析筛。
  
  4.3 组织捣碎机。
  
  4.4 恒温水浴锅。
  
  4.5 可见光分光光度计。
  
  4.6 微量移液管:1.00mL,精度0.01mL。
  
  5 试样的制备
  
  5.1 固体样品
  
  粉末状样品: 取有代表性的样品至少200g,充分混匀,置于密闭的玻璃容器内。
  
  颗粒状样品:取有代表性的样品至少200g,用粉碎机粉碎,或用研钵研细,通过100
  
  目分析筛, 置于密闭的玻璃容器内。
  
  新鲜水果、蔬菜等固体样品:取有代表性的可食部分至少200g,用组织捣碎机捣碎,
  
  置于密闭的玻璃容器内。
  
  5.2 糊状样品
  
  取有代表性的样品至少200g,充分混匀,置于密闭的玻璃容器内。
  
  5.3 固液体样品
  
  取有代表性的样品至少200g,用组织捣碎机捣碎,置于密闭的玻璃容器内。
  
  5.4 液体样品
  
  取有代表性的样品至少200g,充分混匀,置于密闭的玻璃容器内。
  
  6 试液的制备
  
  6.1 不含蛋白质的试样
  
  用100mL烧杯称取试样(5.1~5.4) 0.5~10g(精确至0.0001g),加少量重蒸馏水,转移
  
  到250mL容量瓶中,用重蒸馏水定容至刻度。摇匀后用快速滤纸过滤。弃去最初的滤液30mL,
  
  即为试液。
  
  试液中蔗糖含量大于2000μg/mL时,应适当增加定容体积。
  
  6.2 含蛋白质的试样
  
  用100mL烧杯称取试样(5.1~5.4) 0.5~10g(精确至0.0001g),加少量重蒸馏水,转移
  
  到250mL容量瓶中,加入0.085mol/L 亚铁氰化钾溶液(3.3)5mL、0.25mol/L 硫酸锌溶液
  
  (3.4)5mL和0.1mol/L氢氧化钠溶液(3.5)10mL,使蛋白质沉淀。用重蒸馏水定容至刻度,
  
  摇匀后用快速滤纸过滤。 弃去最初滤液30mL,即为试液。
  
  试液中蔗糖含量大于2000μg/mL时,应适当增加定容体积。

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