6 试液制备
用100mL三角瓶称取试样(5.1~5.4) 0.2~2g(精确至0.0001g),加入20mL二甲基亚砜
(3.3) 和6mol/L盐酸溶液(3.4)5mL,于60±1℃水浴锅中加热30min(每隔5 min 摇动一次)。
冷却至室温后,用6mol/L 氢氧化钠溶液(3.5)和酸度计调整pH值至4.6左右。将溶液转移
到250mL容量瓶中,用重蒸馏水定容至刻度,摇匀后用快速滤纸过滤。弃去最初滤液30mL,
即为试液。
试液中淀粉含量高于1000μg/mL时,可以适当增加定容体积。
7 分析步骤
7.1 标准曲线的绘制
用微量移液管吸取0.00、0.20、0.40、0.60、0.80、1.00mL淀粉标准溶液(3.6),分别
置于10mL比色管中,各加入1mL淀粉葡萄糖苷酶试剂溶液(3.2.1),摇匀,于58±2℃水浴锅
中恒温20min。冷却至室温,加入3mL葡萄糖氧化酶-过氧化物酶试剂溶液(3.2.3),摇匀,在
36±1 ℃水浴锅中恒温40min。冷却至室温,用重蒸馏水定容至10mL,摇匀。用1cm比色皿,
以淀粉标准溶液含量为0.00的试剂溶液调整分光光度计的零点,在波长505nm处测定各比色
管中溶液的吸光度。
以淀粉含量为纵坐标,吸光度为横坐标,绘制标准曲线。
7.2 试液吸光度的测定
用微量移液管吸取0.20~2.00mL试液(6)(依试液中淀粉的含量而定),置于10mL比色管
中。 以下按7.1步骤操作;但须用等量试液(6)调整分光光度计的零点。测出试液吸光度后,
在标准曲线上查出对应的淀粉含量。
8 分析结果的表述
食品中淀粉的含量以质量百分率表示,按下式计算:
C 1 C
x = ─────── × ───────── ×100 = ──────────
V 2 1000 × 1000 V 2
m × ── m × ── × 10000
V 1 V 1
式中:x ━━ 样品中淀粉的含量,质量百分率,%;
C ━━ 标准曲线上查出的试液中淀粉含量,μg;
m ━━ 试样的质量,g;
V 1 ━━ 试液的定容体积,mL;
V 2 ━━ 测定时吸取试液的体积,mL。
计算结果精确至小数点后第二位。
9 允许差
同一样品的两次测定值之差,不得超过两次测定平均值的5.0%。
附录 A (标准的附录)
淀粉葡萄糖苷酶、葡萄糖氧化酶、过氧化物酶的技术要求、试验方法及判定规则
A 1 技术要求
A 1.1 酶活力
淀粉葡萄糖苷酶活力(U/mg) ≥ 2;
葡萄糖氧化酶活力(U/mg) ≥ 20;
过氧化物酶活力(U/mg) ≥ 50。
A 1.2 干扰酶
淀粉葡萄糖苷酶、葡萄糖氧化酶、过氧化物酶都不得含有纤维素酶、β-果糖苷酶、
半乳糖苷酶和过氧化氢酶。
A 2 试验方法
用微量移液管吸取0.50mL 淀粉标准溶液 (3.6),置于 10mL 比色管中,加入 100μg
乳糖 (HG3-1000,分析纯)、100μg蔗糖 (HG3-1001,分析纯)和100μg 纤维二糖 (生化
纯), 再加入1mL淀粉萄葡苷酶试剂溶液(3.2.1),以下按 7.1 步骤操作。测定吸光度后,
在标准曲线 (7.1) 上查出对应的淀粉含量,按下式计算淀粉的回收率:
C
R = ────── × 100
0.5 × 200
式中:R ━━ 淀粉的回收率,%;
C ━━ 淀粉的实测值,μg。
A 3 判定规则
测得淀粉的回收率,如在95%~105%范围内,则判定淀粉葡萄糖苷酶、葡萄糖氧化
酶和过氧化物酶符合技术要求。
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国家技术监督局1996-04-10批准 1996-12-01实施