AGS
(C6H10O5)n + nH2O ────> nC6H12O6
GOD
C6H12O6 + O2 ────> C6H10O6 + H2O2
POD
H2O2 + C6H5OH + C11H13N3O ────> C6H5NO + H2O
3 试剂
3.1 组合试剂盒
1 号瓶:内含淀粉葡萄糖苷酶(amyloglucosidase)200U(活力单位)、柠檬酸、柠檬酸
三钠;
2 号瓶:内含0.2mol/L磷酸盐缓冲液 (pH=7.0) 200mL,其中含4 ─ 氨基安替比林
为0.00154mol/L;
3 号瓶:内含 0.022mol/L苯酚溶液200mL;
4 号瓶:内含葡萄糖氧化酶(glucose oxidase)800U(活力单位)、过氧化物酶(辣根,
peroxidase)2000U(活力单位)。
1、2、3、4号瓶须在4℃左右保存。
3.2 酶试剂溶液
3.2.1 将1号瓶中的物质用重蒸馏水溶解,使其体积为66mL。轻轻摇动(勿剧烈摇动),使酶
完全溶解。此溶液即为淀粉葡萄糖苷酶试剂溶液,其中柠檬酸(缓冲溶液)浓度为0.1mol/L,
pH=4.6。在 4℃左右保存,有效期 1个月。
3.2.2 将2号瓶与3号瓶中的溶液充分混合。
3.2.3 将4号瓶中的酶溶解在3.2.2混合液中,轻轻摇动(勿剧烈摇动),使酶完全溶解,
即葡萄糖氧化酶-过氧化物酶试剂溶液。在4℃左右保存,有效期1个月。
3.3 二甲基亚砜(分析纯)
3.4 6mol/L盐酸溶液
将12mol/L 盐酸(GB622,分析纯)与等体积重蒸馏水混合,摇匀。
3.5 6mol/L氢氧化钠溶液
称取24g 氢氧化钠(GB629,分析纯),溶于1000mL重蒸馏水中,摇匀。
3.6 淀粉标准溶液
称取经100±2℃干燥2h的可溶性淀粉(HG3095,分析纯)0.2000g,溶于少量60℃重蒸
馏水中,冷却后定容至100mL,摇匀。将此溶液用重蒸馏水稀释V10.00─→V100,即200
μg/mL淀粉标准溶液。
4 仪器和设备
实验室常规仪器及下列各项:
4.1 研钵或粉碎机。
4.2 分析筛。
4.3 组织捣碎机。
4.4 恒温水浴锅。
4.5 可见光分光光度计。
4.6 酸度计或pH计。
4.7 微量移液管:1.00mL,精度0.01mL。
5 试样的制备
5.1 固体样品
粉末状样品: 取有代表性的样品至少200g,充分混匀,置于密闭的玻璃容器内。
颗粒状样品:取有代表性的样品至少200g,用粉碎机粉碎,或用研钵研细,通过
100目分析筛,置于密闭的玻璃容器内。
5.2 糊状样品
取有代表性的样品至少200g,充分混匀,置于密闭的玻璃容器内。
5.3 固液体样品
取有代表性的样品至少200g,用组织捣碎机捣碎,置于密闭的玻璃容器内。
5.4 液体样品
取有代表性的样品至少200g,充分混匀,置于密闭的玻璃容器内。