糖类被水解为还原糖，导致测定结果偏高。本标准采用的酶-比色法是在检索了近20年148
篇国外文献的基础上，经过反复实验、验证而制定的。由于酶法具有高度的专一性(β-果
糖苷酶只能催化蔗糖转化为葡萄糖和果糖)，灵敏度高，操作简便，因此测定结果准确。
蔗糖酶解后的产物-葡萄糖的测定方法，与 GB／T 16285－96保持一致。
本标准的附录 A是标准的附录。
本标准由全国食品工业标准化技术委员会提出并归口。
本标准起草单位：中国农垦北方食品监测中心。
本标准经全国食品工业标准化技术委员会秘书处审核。
本标准主要起草人：张宗城，刘宁，郝煜。
目 次
前言
1 范围 ………………………………………………………………………………………… X
2 原理 ………………………………………………………………………………………… X
3 试剂 ………………………………………………………………………………………… X
4 仪器和设备 ………………………………………………………………………………… X
5 试样的制备 ………………………………………………………………………………… X
6 试液的制备 ………………………………………………………………………………… X
7 分析步骤 …………………………………………………………………………………… X
8 分析结果的表述 …………………………………………………………………………… X
9 允许差 ……………………………………………………………………………………… X
附录A (标准的附录) ………………………………………………………………………… X
中华人民共和国国家标准
食品中蔗糖的测定方法 GB／T 16286-96
酶－比色法
Method for Determination of sucrose in food
Enzyme-Colorimetric method
━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━
1 范围
本标准规定了用酶－比色法测定食品中蔗糖的方法，适用于各类食品中蔗糖的测定。
本标准最低检出限量为0.04μg(蔗糖)／mL(试液)。
2 原理
在β－果糖苷酶(β－FS)催化下，蔗糖被酶解为葡萄糖和果糖。葡萄糖氧化酶(GOD)
在有氧条件下，催化 β－D－葡萄糖(葡萄糖水溶液状态)氧化，生成D －葡萄糖酸－δ－
内酯和过氧化氢。受过氧化物酶(POD)催化，过氧化氢与4 －氨基安替比林和苯酚生成红
色醌亚胺。 在波长505nm处测定醌亚胺的吸光度，计算食品中蔗糖的含量。
β－FS
C12H22O11 ＋ H2O ────> C6H12O6(G) ＋ C6H12O6(F)
GOD
C6H12O6(G) ＋ O2 ────> C6H10O6 ＋ H2O2
POD
H2O2 ＋ C6H5OH ＋ C11H13N3O ────> C6H5NO ＋ H2O
3 试剂
3.1 组合试剂盒
1号瓶：内含β－果糖苷酶(fructosidase)400U(活力单位)、柠檬酸、柠檬酸三钠；
2号瓶：内含 0.2mol／L 磷酸盐缓冲液 (pH＝7.6) 200mL，其中含 4 －氨基安替比
林0. 00154mol／L；
3号瓶：内含 0.022mol／L苯酚溶液200mL；
4号瓶：内含葡萄糖氧化酶(glucose oxidase)800U(活力单位)、过氧化物酶(辣根，
peroxidase)2000U(活力单位)。
1、2、3、4号瓶须在4℃左右保存。
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