-----------------------------------------孢 子 数 测 定 法 ZB X 66028-87
孢 子 数 测 定 法 ZB X 66028-87
Enumeration of spore
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本方法适用于酿造酱油半成品?菌种的孢子数测定。
1 仪器与试剂
a. 显微镜、血球计数板、盖片;
b. 95%酒精、稀硫酸 (1∶10);
c. 平天: 感量0.001g 。
2 操作方法
2.1 样品稀释:精确称取种曲或二级菌种1g (称淮至0.002g),倒入盛有玻璃珠的250mL
锥形瓶内,加95%酒精5mL,加无菌水20mL,加稀硫酸10mL,充分振摇,使分生孢子个个分散,
然后用多层纱布过滤、冲洗,务使滤渣不含孢子,稀释至500mL。
2.2 制片:取稀释液1滴,滴于血球计数板的计算格上,然后将盖片轻轻由一边向另一
边压下,使盖片与计数板完全密合,液中无气泡,用滤纸吸干多余的溢出悬浮孢子液,静置
数分钟,待孢子沉降。
2.3 观察计数:用
=5×10**4×━━ ……………………………(2)
G
式中:n??80小格内孢子总数,个;
V??孢子稀释液体积,mL;
G??样品重量,g。
4 注意事项
4.1 称样要尽量防止孢子的飞扬。
4.2 测定时,如果发现有许多孢子结集成团或成堆,说明样品稀释未能符合操作要求。
因此必须重新称重、振摇、稀释。
4.3 生产实践中应用时,种曲以干物质计算。因而需要同时测定种曲水分,计算时样
品重量则改为绝干重量。
样品绝干重量=G(1-W)…………………………………(3)
式中:G??样品重,g;
W??样品水分的百分比含量,%。
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附加说明:
本标准由商业部副食品局提出。
本标准由上海市酿造科学研究所起草。
本标准主要起草人须凤高。
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中华人民共和国商业部1987-11-20批准 1988-07-01实施