中华人民共和国国家标准 果蔬汁饮料中L-抗坏血酸的测定方法
乙醚萃取法

Determination method for L-ascorbic acid in GB 12143.3-89
fruit and vegetable juice beverages-
Ethyl ether extraction method
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1 主题内容与适用范围
本标准规定了使用2,6-二氯靛酚滴定-乙醚萃取法测定果蔬汁饮料中L-抗坏血到含量
的方法。
本标准适用于浓缩果蔬汁、果蔬原汁、果蔬汁饮料、果蔬汁碳酸饮料及果蔬汁固体
饮料中L－抗坏血酸的测定,尤其适用于深色果蔬汁饮料中L-抗坏血酸的测定。但不适用
于脱氢抗坏血酸的测定。
2 引用标准
GB 601 化学试剂 标准溶液制备方法
GB 686 化学试剂 丙酮
HG 3-1002 化学试剂 乙醚
3 原理
本法根据氧化还原反应原理,2,6-二氯靛酚能被L-抗坏血酸还原为无色体,微过量的
2,6-二氯靛酚用乙醚提取,然后由醚层中的玫瑰红色来确定滴定终点。
4 试剂
所用的试剂均为分析纯,所用的水均为蒸馏水或同等纯度的水(以下简称水)。
4.1 丙酮：符合 GB 686.
4.2 乙醚：符合HG 3-1002.
4.3 10%硫酸铜溶液：称取10g硫酸铜(CuSO4?5H2O)溶解于水,并稀释至100ml.
4.4 2%草酸溶液：称取20g草酸(C2H2O4?2H2O)溶解于水,并稀释至1L.
1 
4.5 0.1 mol/L(──I2)碘标准滴定溶液：按GB 601 第2章第10条配制与标定,贮存
2
于棕色瓶中。 1 1
4.6 0.01 mol/L(─I2)碘标准滴定溶液：将0.1mol/L(─I2)碘标准滴定溶液在使用时
2 2
稀释V25mL→V250mL,浓度以C1表示。
4.7 0.88mg/mL抗坏血酸标准溶液：称取0.22g抗坏血酸,用2%草酸溶液(4.4)溶解并稀
释到250mL。
标定：吸取抗坏血酸标准溶液20.00mL,加0.5%淀粉指示液(4.10)1mL,用0.01 mol/L(
1
─I2)(4.6)碘标准滴定溶液滴定至呈微蓝色为止。
2
C1?V1
C2 = ─────-×88 ……………………………………(1)
20
式中：C2??L-抗坏血酸溶液的浓度,mg/mL;
C1??碘标准滴定溶液的浓度,mol/L;
V1??标定时所用碘标准滴定溶液的体积,ml;
1 
88??1 mL 1 mol/L(───I2)碘标准滴定溶液相当于L-抗坏血酸的毫克数。
2
4.8 0.088 mg/ML L-抗坏血酸标准溶液：吸取0.88 mg/mL L-抗坏血酸标准溶液(4.7)
25.00mL,用2%草酸溶液稀释,V25mL→V250mL.
注：4.7和4.8的L-抗坏血酸溶液在使用时配制。
4.9 2-6-二氯靛酚标准滴定溶液：称取200mg,2,6-二氯靛酚,用少量热的重蒸馏水湿
润,然后再慢慢加入热的重蒸水,搅拌溶解,过滤。冷却后,滤液用重蒸馏水稀释到1L.保
存于冰箱中。一星期至少标定一次。
标定：吸取10.00mL L-抗坏血酸标准溶液(4.8)置于50mL比色管中,按测定样品的步
骤标定2.6-二氯靛酚溶液的滴定度。
m
F = ── …………………………………………(2)
V
式中：F??2,6-二氯靛酚溶液的滴定度,即 1 mL 2,6-二氯靛酚溶液相当于L-抗坏血
酸的毫克数,mg/mL;
m??10 mL L-抗坏血酸标准溶液中含抗坏血酸的量,mg;
V??标定时所用2.6-二氯靛酚溶液的体积,mL.
4.10 5g/L淀粉指示液：称取0.5g可溶性淀粉,用5mL冷水调匀,将所得乳浊液在搅拌下
徐徐注入100 mL沸腾着的水中,再煮沸2～3min,使溶液透明。加0.1g碘化汞作保存剂。
5 仪器
实验室常用仪器及下列各项：
5.1 10 mL微量滴定管。
5.2 50 mL 100mL比色管。
5.3 125 mL分液漏斗。
6 试液的制备
水果、蔬菜中抗坏血酸的含量见附录 A。
6.1 浓缩汁
在浓缩汁中加入与在浓缩过程中失去的天然水分等量的水,使成为原汁。然后同原汁
一一样取一定量样品,稀释、混匀供测。
6.2 原汁
称取含抗坏血酸4～10 mg有代表性的样品（精确到0.001g）,用2%草酸溶液稀释到
200 mL,混匀供测。
6.3 果汁饮料、果蔬汁水
6.3.1 抗坏血酸含量在0.05mg/mL以下的样品,混匀后直接取样测定。
6.3.2 抗坏血酸含量在0.05mg/mL以上的样品,称取含抗坏血到4～10mg有代表性的样品
（精确到0.001g）,用2%草酸溶液稀释到200mL,混匀供测。
6.4 果蔬汁碳酸饮料
先将样品旋摇到基本无气泡后,按6.3条制备。
6.5 固体饮料
称取含抗坏血酸4～10mg有代表性的样品(精确到0.001g),用2%草酸溶液溶解并稀释
至200mL,混匀供测。
6.6 乙醚抽提处理
对于高度乳化或样液色泽较深且易被乙醚抽提的样品,取样后置分液漏斗中。加30mL
乙醚,充分振摇但勿使之乳化。待分层后将下层样液放入200mL容量瓶中,分液漏斗中加入
20mL2%草酸溶液。适当振摇,待分层后,将下层水溶液放入上面的200mL容量瓶中。如此反
复操作4次,将每次的下层水溶液均放入200mL容量瓶内,然后用2%草酸溶液稀释至刻度。
6.7 空白试液的制备
按试液制备中所确定的取样量称取同一样品(精确到0.001g),置于250mL锥形瓶中,加
20mL10%硫酸铜溶液,加水使总体积约为100mL,置于垫有石棉网的电炉上,小心加热至沸并
保持微沸15min,然后用流动水冷却到室温。将此溶液转移到200mL容量瓶中,用水稀释至刻
度,摇匀,供空白测定。
7 分析步骤
7.1 试液的制定
取10～15支50mL比色管,在每支比色管中加入10.00mL按第6章制备好的试液,各加2.
5mL丙酮。放置3min后,在第一支比色管中加入1 mL2,6-二氯靛酚溶液,充分混匀,精确控
制40s后,加入2 mL乙醚,充分振摇,放置几分钟,待乙醚与水溶液分层后,观察醚层有无
出现玫瑰红色。当出现淡玫瑰红色时,则表明已达到测定的暂定终点。如果2,6-二氯靛酚
全部被抗坏血酸还原,乙醚层保持无色,则在第二支比色管中加入1.5mL 2,6-二氯靛酚溶
液。如还不显红色,再逐一按2.0、2.5、3.0、3.5、4.0、4.5、5.0mL的量加入2,6-二氯靛
酚溶液,直到乙醚层出现玫瑰红色达到暂定终点为止。这时所加的2,6-二氯靛酚的量常常
是过量的,所以需进一步试验,确定精确的终点。
如果加到3.0mL 2,6-二氯靛酚溶液时出现玫瑰红色,则从第六支加有试液的比色管
中开始分别加入2.6、2.7、2.8、2.9mL 2,6-二氯靛酚溶液,直至呈现淡玫瑰红色为止。如
在2.9mL刚呈红色,则2.9mL为精确终点。如加到2.9mL 2,6-二氯靛酚溶液仍不显玫瑰红色,
则上面的3.0mL就是精确终点。所用2,6-二氯靛酚溶液为α毫升。
对于抗坏血酸含量低于2 mg/100g的样品,用100mL比色管直接加倍取样测定。丙酮与
乙醚的加量也相应加倍,操作同上。
对于同一个被测样液需平行测定三次。
7.2 空白试液的测定
吸取空白试液10.00mL于比色管中,同7.1加丙酮并逐一按0.05、0.10、0.15、0.20mL
的量加入2,6-二氯靛酚溶液,测得在乙醚层中刚呈现玫瑰红色所需的2,6-二氯靛酚溶液的
量为b毫升。
8 结果的表示
8.1 计算
(a-b)×F
X = ─────×100……………………………………(3) 
m
式中：X??100g(或mL)样品所含L-抗坏血酸的毫克数,mg/100g(或mL);
a??测定试液时所需2,6-二氯靛酚溶液的体积,mL;
b??测定空白试液时所需2,6-二氯靛酚溶液的体积,mL;
f??2,6-二氯靛酚溶液的滴定度,mg/mL,即每mL此溶液相当于L-抗坏血酸的mg数；
m??10 mL试液中所含样品的量,g(或mL).
注：以误差在允许范围内的三次测定结果的算术平均值报告结果,精确到小数点后第一
位。
8.2 允许误差
同一样品三次测定结果的相对偏差为：其抗坏血酸含量大于或等于10mg/100g的样品应小
于2%,含量小于10mg/100g的样品应小于5%.
附 录 A 
水果、蔬菜中抗坏血酸含量
（参考件）
表 A1 mg/100g
────┬────┬─────┬───┬─────┬────
名 称│ 含 量│ 名 称 │含 量│ 名 称 │ 含 量
────┼────┼─────┼───┼─────┼────
葡 萄│ 1～2 │ 荔 枝 │ 3～30│ 番 茄 │ 8～33
柚 │ 39～51 │ 龙 眼 │ 60 │ 南 瓜 │ 7～14 
沙田柚 │ 123 │ 枇 杷 │ 16 │ 冬 瓜 │ 8～18 
甜 橙│ 54 │ 无花果 │ 1 │ 黄 瓜 │ 4～14
橙 │ 37 │桑葚（白）│ 5 │ 苦 瓜 │ 16～84 
柑 桔│ 34 │桑葚（紫）│ 19 │ 青 豆 │ 24
柠 檬│ 40 │香 蕉 │ 6～19│ 菜 豆 │ 6～14 
苹 果│ 微～2 │菠 罗 │ 7～24│ 胡萝卜 │ 6～19
沙 果│ 1 │椰子（肉）│ 2 │ 白萝卜 │ 11～37 
海 棠│ 2 │椰子（水）│ 2 │ 红萝卜 │ 11～27
梨 │ 1～4 │橄 榄 │ 21 │ 青萝卜 │ 16～31
桃 │ 3～10 │栗 子 │ 60 │心里美萝卜│ 34
杨 桃│ 8～18 │莲 子 │ 17 │ 莲 藕 │ 37～55
杏 │ 7～10 │芒 果 │21～41│ 卷心菜 │ 60
李 │ 1 │ 菱 │ 5 │苋菜（红）│ 38～48 
草 莓│ 35 │刺 梨 │25～85│ 雪里蕻 │ 83 
樱 桃│ 3～11 │ 猕猴桃 │ 213 │芹 菜 │ 6～41
番石榴 │ 28～74 │西 瓜 │3～7 │ 柿子椒 │56～114
枣 │ 540 │甜 瓜 │7～15 │ │
山 楂│ 89 │ 哈蜜瓜 │ 13 │ │
────┴────┴─────┴───┴─────┴────
注：本表摘自《食物成分表》,1985年版,中国医科院卫生研究所编。

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附加说明：
本标准由中华人民共和国轻工业部提出。
本标准由轻工业部食品发酵工业科学研究所技术归口。
本标准由轻工业部食品发酵工业科学研究所负责起草。
本标准起草人龚玲娣、徐清渠。
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国家技术监督局1989-12-29批准 1990-10-01实施?