中华人民共和国国家标准 　　　　肉制品　胭脂红着色剂测定　　　　　 GB 9695.6-88

Meat products?Method for determination
of artificial colour ponceau-4R
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1　主题内容与适用范围
本标准规定了肉制品中胭脂红着色剂的测定方法。
本标准适用于仅含胭脂红着色剂的肉制品中胭脂红的测定。
2　引用标准
GB 9695.19 肉与肉制品 取样方法
3　原理
试样脱脂后用碱性溶液提取胭脂红色素,提取液沉淀蛋白质,用聚酰胺粉使胭脂红吸
附和解吸而纯化,用比色法测定。
4　试剂
除另有说明外,所用试剂均为分析纯,所用水为蒸馏水或相当纯度的水。
4.1　聚酰胺粉(尼龙6):200目。
4.2　硫酸(GB 625) :1:10溶液。
4.3　柠檬酸(HG 3?1108): 20%溶液。
4.4　钨酸钠(HG B 3172): 10%溶液。
4.5　石油醚(HG 3?1003): 沸程60～90℃。
4.6　海砂：化学纯,先用1:10盐酸溶液煮沸15min,用水洗至中性,再用5%氢氧化钠溶
液煮15min用水洗至中性,于105℃干燥,贮于具塞瓶中, 备用。
4.7　乙醇-氨溶液：取氨水1mL,加70%乙醇至100mL。
4.8　氢氧化胺(GB 631):　1:99溶液。
4.9　胭脂红标准溶液：
4.9.1　胭脂红标准贮备液：称取胭脂红食用色素0.100g,用20%柠檬酸酸化至pH6的水定
容至100mL此溶液胭脂红含量为1mg/mL。
4.9.2　胭脂红标准使用液:临用时吸取标准贮备液5.0mL,用20%柠檬酸酸化至pH6的水定
容至50mL此溶液胭脂红含量为0.1mg/mL。
5　仪器和设备
5.1　实验室常规仪器和设备。
5.2　绞肉机：孔径不超过4mm。
5.3 G3砂芯漏斗。
5.4　分光光度计。
6　试样
6.1 按GB 9695.19取样。
6.2 至少取有代表性的试样200g,于绞肉机中至少绞两次使其均质化并混匀,试样贮存
期间必须防止腐败和成分变化,尽快分析试样。
7　分祈步骤
7.1　提取
称取试样5.0～10.0g置研钵中,加海砂少许,仔细研磨至粉末状,吹冷风使试样略为
干燥,加入石油醚50mL,搅拌,放置片刻,倾出石油醚,如此重复处理三次,除去脂防,
吹干。加入乙醇-氨溶液提取胭脂红,通过砂芯漏斗抽滤提取液,反复多次,直至胭脂红
全部提完,收集全部提取液于250mL锥形瓶中。
7.2　沉淀蛋白质
在水浴上使提取液浓缩至10mL以下,依次加入1:10硫酸溶液1.0mL和10%钨酸钠溶液
1mL混匀,继续加热5min,沉淀蛋白质。取下,彻底冷却至室温,过滤,用少量水洗涤滤
纸,滤液准确稀释至50mL或100mL,备用。
7.3　纯化
吸取滤液25.0mL于100mL锥形瓶中,在水浴上加热到70℃,加入聚酰胺粉0.5～1g,充
分搅拌,使胭脂红完全被吸附。将聚酰胺粉全部转入G3砂芯漏斗,缓慢地抽滤。用20%柠
檬酸酸化至pH4的70℃水分三次洗涤,每次20mL,再用70℃水多次洗涤至滤液为中性。以
上洗涤过程要搅拌。用1 : 99氨溶液分次解吸全部胭脂红色素,收集全部解吸液,于水浴
上驱氨,准确稀释至25mL或50mL,备用。
同一试样进行两次测定,并做空白试验。
7.4　测定
分别吸取胭脂红标准使用液0.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0mL置50mL容量瓶中,稀
释至刻度,此时瓶中胭脂红浓度分别为0、4、8、12、16、20μg/mL,上述标准溶液用1cm
比色杯,以标准系列空白调节零点,在510nm波长下测定吸光度,绘制标准曲线。试液用1cm
比色杯,以试剂空白调节零点,与标准同样条件测定。根据试液的吸光度从标准曲线上查
得相应的胭脂红浓度。
8　分析结果的计算
c×10**-6
X (g/kg) = ━━━━━━━━━━━━
25 1 
m×━━×━━×10**-3
V1 V2
式中: X??试样中胭脂红含量,g/kg;
c??试液中胭脂红浓度,μg/mL;
m??试样质量,g;
V1??试样沉淀蛋白质后总体积,mL;
V2??试样胭脂红解吸后总体积,mL。
当分析结果符合允许差的要求时, 则取两次测定的算术平均值作为结果, 精确至
0.001g/kg。
9　允许差
由同一分析者同时或相继进行的两次测定结果之差不得超过0.01g/kg。

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附加说明：
本标准由中华人民共和国商业部食品局提出。
本标准由中国肉类食品综合研究中心归口。
本标准由上海市食品公司卫生检测研究中心站负责起草。
本标准主要起草人翟为安、费莎、潘珏。
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中华人民共和国商业部1988-02-25批准 1989-03-01实施