中华人民共和国国家标准 　　　植物油脂检验　磷脂测定法 GB 5537?85

Inspection of vegetable oils 
Methods for determination of phosphatide
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本标准适用于商品植物油脂中磷脂的测定。油脂中磷脂即由甘油、脂肪酸、磷酸和氨
基醇等所组成的复杂的化合物。
1　钼蓝比色法
1.1 仪器和用具
1.1.1　瓷坩埚或石英坩埚；
1.1.2 分光光度计或带塞的50ml比色管;
1.1.3　移液管：5、10ml；
1.1.4　电炉、高温炉；
1.1.5 容量瓶：100、500、1000ml;
1.1.6　表面皿、烧杯、量筒；
1.1.7 恒温水浴锅；　　
1.1.8　漏斗、坩埚钳、试剂瓶等。
1.2 试剂
1.2.1 50％氢氧化钾溶液；
1.2.2　盐酸、硫酸、氧化锌、滤纸；
1.2.3　0.015％硫酸联氨溶液；
1.2.4 2.5％钼酸钠稀硫酸溶液：量取140ml硫酸注入300ml水中，摇匀，冷却至室温，
加入12.5g钼酸钠，溶解后加水至500ml，摇匀，静置24h备用。
1.2.5　磷标准溶液:称取无水的磷酸二氢钾0.4391g溶于1000ml水中，作为1号液，含
磷0.1mg／ml，吸取1号液10ml，加水稀释至100ml，含磷0.01mg/ml，作为2号液，比
色用。
1.3 操作方法
1.3.1　绘制标准曲线：取5只50ml比色管，编成1，2，4，6，8五个号码，按号码顺序
分别注入磷标准2号液1，2，4，6，8ml，再按顺序分别加水9，8, 6，4，2ml。接着向
5只管内各加0.015％硫酸联氨溶液8.0ml;各加钼酸钠稀硫酸溶液2.0ml，加塞、摇匀。
去塞，将5只管置于正在沸腾的水浴中加热10min,取出冷却至室温,用水稀释至50ml,充
分摇匀,经10 min后，用分光光度计在波长650nm下，用3cm液槽，用水调整零点，分别测
定消化值。以消化值为纵坐标，以磷量(0.01、0.02、0.04、0.06、0.08mg)为横坐标
绘制标准曲线。
1.3.2 制备被测液：用坩埚称取试样约10g(准确至0.001g)，加氧化锌0.5g，先在电
炉上加热炭化，然后送入550～600℃的高温炉中灼烧至灰化(白色)，灼烧时间约2h，
取出坩埚冷却至室温，用热盐酸(1∶1)10ml溶解灰分，并加热微沸5min，将溶解液过滤
注入100ml容量瓶中，用热水冲洗后坩埚和滤纸，待滤液冷却至室温后，用50％氢氧
化钾溶液中和至出现混浊,缓慢滴加盐酸使氧化锌沉淀全部溶解后,再滴2滴，最后出
水稀释至刻度，摇匀。
1.3.3 比色：用移液管吸取被测液10ml注入50ml比色管中，加入0.015％硫酸联氨
8.0ml,加2.0ml钼酸钠稀硫酸溶液,加塞,摇匀。去塞，将比色管置于正在沸腾的水浴中
加热10min，取出冷却至室温，用水稀释至50ml，充分摇匀，经10min后，用分光光度
计在波长650nm下，用3cm液槽，用水调整零点，测定消光值。
1.4　结果计算
根据被测液的消光值，从标准曲线查得磷量(P)，按公式(1)计算磷脂含量：
V2 100
磷脂 (%) = P×──×26.31×───── ...............(1)
V1 W×1000
式中：P??标准曲线查得的磷量，mg；
V2??样品灰化后稀释的体积，ml;
V1??比色时所取的被测液体积，ml;
26.31??每毫克磷相当于磷脂的毫克数；
W??试样重量，g。
双试验结果允许差不超过0.04％，求其平均数，即为测定结果。测定结果取小数
点后第二位。
2　重量法
2.1　仪器和用具
2.1.1　玻璃漏斗、漏斗架；
2.1.2 烧杯：100ml；
2.1.3 锥形瓶、滤纸等。
2.2 试剂
丙酮。
2.3 操作方法
取混匀的样品约100ml，加热约9O℃时进行过滤。用烧杯称取试样25g，加热至80℃，
加水2～2.5ml，充分搅拌使之水化，在室温下静置过夜，或进行离心沉淀，倾出上层清
液，用已知恒重的滤纸(或用抽气装置抽滤)进行过滤，待滤液全部滤出后，用冷的丙酮把
杯内残留的沉淀冲洗入滤纸中，继续用丙酮洗涤滤纸和沉淀，洗至无油迹为止。待滤纸和
沉淀上的丙酮挥尽后，送入105℃烘箱中烘至恒重。
2.4 结果计算
重量法测定磷脂含量按公式(2)计算：
W1
磷脂(%) = ── × 100 ....................................(2)
W
式中: W1??沉淀物重量，g;
W??试样重量，g。
双试验结果允许差不超过0.04％，求其平均数，即为测定结果。测定结果取小数点后
第二位。

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附加说明：
本标准由中华人民共和国商业部提出。
本标准由商业部粮食储运局负责起草。
本标准主要起草人高修吾、杨浩然、吴艳霞、吕桂芬。
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国家标准局1985-11-02发布 1986-07-01实施