前　　　言　　　　　　　　　　　　　　　　前　　　言

食品中淀粉测定方法，一般采用化学方法-酸水解法。由于酸水解淀粉时，样品中的
其他糖类被分解为还原糖(单糖)，造成淀粉的测定结果偏高。本标准采用酶-比色法是在
检索了近20年74篇国外文献的基础上，经过反复实验、验证而制定的。要使食品中的淀粉
含量测定准确，必须使淀粉完全溶解。本标准汲取了法国Cuher.J.C 1982年总结的有效溶
解方法，即二甲基亚砜法，达到了使淀粉完全溶解的目的。
淀粉酶解后的产物-葡萄糖的测定方法，与 GB／T 16285-96保持一致。
本标准的附录 A是标准的附录。
本标准由全国食品工业标准化技术委员会提出并归口。
本标准起草单位：中国农垦北方食品监测中心。
本标准经全国食品工业标准化技术委员会秘书处审核。
本标准主要起草人：张宗城，刘宁，郝煜。

目　　　次

前言
1 范围 ………………………………………………………………………………………… X
2 原理 ………………………………………………………………………………………… X
3 试剂 ………………………………………………………………………………………… X
4 仪器和设备 ………………………………………………………………………………… X
5 试样的制备 ………………………………………………………………………………… X
6 试液的制备 ………………………………………………………………………………… X
7 分析步骤 …………………………………………………………………………………… X
8 分析结果的表述 …………………………………………………………………………… X
9 允许差 ……………………………………………………………………………………… X
附录A (标准的附录) ………………………………………………………………………… X

中华人民共和国国家标准

食品中淀粉的测定方法 GB／T 16287-96
酶－比色法

Method for determination of starch in food
Enzyme－Colorimetric method
━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━
1 范围
本标准规定了用酶-比色法测定食品中淀粉的方法，适用于各类食品中淀粉的测定。
本标准最低检出限量为0.09μg(淀粉)／mL(试液)。
2 原理
淀粉在淀粉葡萄糖苷酶(AGS)催化下，最终水解为葡萄糖。葡萄糖氧化酶(GOD)在有氧
条件下，催化β-D-葡萄糖(葡萄糖水溶液)氧化，生成D-葡萄糖酸-δ-内酯和过氧化氢。
受过氧化物酶(POD)催化，过氧化氢与4-氨基安替比林和苯酚生成红色醌亚胺。在505nm波
长处测醌亚胺的吸光度，计算食品中淀粉的含量。
AGS
(C6H10O5)n ＋ nH2O ────> nC6H12O6
GOD
C6H12O6 ＋ O2 ────> C6H10O6 ＋ H2O2
POD
H2O2 ＋ C6H5OH ＋ C11H13N3O ────> C6H5NO ＋ H2O
3 试剂
3.1 组合试剂盒
1 号瓶：内含淀粉葡萄糖苷酶(amyloglucosidase)200U(活力单位)、柠檬酸、柠檬酸
三钠；
2 号瓶：内含0.2mol／L磷酸盐缓冲液 (pH＝7.0) 200mL，其中含4 ─ 氨基安替比林
为0.00154mol／L；
3 号瓶：内含 0.022mol／L苯酚溶液200mL；
4 号瓶：内含葡萄糖氧化酶(glucose oxidase)800U(活力单位)、过氧化物酶(辣根，
peroxidase)2000U(活力单位)。
1、2、3、4号瓶须在4℃左右保存。
3.2 酶试剂溶液
3.2.1 将1号瓶中的物质用重蒸馏水溶解，使其体积为66mL。轻轻摇动(勿剧烈摇动)，使酶
完全溶解。此溶液即为淀粉葡萄糖苷酶试剂溶液，其中柠檬酸(缓冲溶液)浓度为0.1mol／L，
pH＝4.6。在 4℃左右保存，有效期 1个月。
3.2.2 将2号瓶与3号瓶中的溶液充分混合。
3.2.3 将4号瓶中的酶溶解在3.2.2混合液中，轻轻摇动(勿剧烈摇动)，使酶完全溶解， 
即葡萄糖氧化酶-过氧化物酶试剂溶液。在4℃左右保存，有效期1个月。
3.3 二甲基亚砜(分析纯)
3.4 6mol／L盐酸溶液
将12mol／L 盐酸(GB622，分析纯)与等体积重蒸馏水混合，摇匀。
3.5 6mol／L氢氧化钠溶液
称取24g 氢氧化钠(GB629，分析纯)，溶于1000mL重蒸馏水中，摇匀。
3.6　淀粉标准溶液
称取经100±2℃干燥2h的可溶性淀粉(HG3095，分析纯)0.2000g，溶于少量60℃重蒸
馏水中，冷却后定容至100mL，摇匀。将此溶液用重蒸馏水稀释V10.00─→V100，即200
μg／mL淀粉标准溶液。
4 仪器和设备
实验室常规仪器及下列各项：
4.1 研钵或粉碎机。
4.2　分析筛。
4.3 组织捣碎机。
4.4 恒温水浴锅。
4.5 可见光分光光度计。
4.6 酸度计或pH计。
4.7　微量移液管：1.00mL，精度0.01mL。
5 试样的制备
5.1 固体样品
粉末状样品: 取有代表性的样品至少200g，充分混匀，置于密闭的玻璃容器内。
颗粒状样品：取有代表性的样品至少200g，用粉碎机粉碎，或用研钵研细，通过
100目分析筛，置于密闭的玻璃容器内。
5.2 糊状样品
取有代表性的样品至少200g，充分混匀，置于密闭的玻璃容器内。
5.3 固液体样品 
取有代表性的样品至少200g，用组织捣碎机捣碎，置于密闭的玻璃容器内。
5.4 液体样品
取有代表性的样品至少200g，充分混匀，置于密闭的玻璃容器内。
6 试液制备
用100mL三角瓶称取试样(5.1～5.4) 0.2～2g(精确至0.0001g)，加入20mL二甲基亚砜
(3.3) 和6mol／L盐酸溶液(3.4)5mL，于60±1℃水浴锅中加热30min(每隔5 min 摇动一次)。
冷却至室温后，用6mol／L 氢氧化钠溶液(3.5)和酸度计调整pH值至4.6左右。将溶液转移
到250mL容量瓶中，用重蒸馏水定容至刻度，摇匀后用快速滤纸过滤。弃去最初滤液30mL，
即为试液。
试液中淀粉含量高于1000μg／mL时，可以适当增加定容体积。
7 分析步骤
7.1 标准曲线的绘制
用微量移液管吸取0.00、0.20、0.40、0.60、0.80、1.00mL淀粉标准溶液(3.6)，分别
置于10mL比色管中，各加入1mL淀粉葡萄糖苷酶试剂溶液(3.2.1)，摇匀，于58±2℃水浴锅
中恒温20min。冷却至室温，加入3mL葡萄糖氧化酶-过氧化物酶试剂溶液(3.2.3)，摇匀,在
36±1 ℃水浴锅中恒温40min。冷却至室温，用重蒸馏水定容至10mL，摇匀。用1cm比色皿，
以淀粉标准溶液含量为0.00的试剂溶液调整分光光度计的零点，在波长505nm处测定各比色
管中溶液的吸光度。
以淀粉含量为纵坐标，吸光度为横坐标，绘制标准曲线。
7.2 试液吸光度的测定
用微量移液管吸取0.20～2.00mL试液(6)(依试液中淀粉的含量而定)，置于10mL比色管
中。 以下按7.1步骤操作；但须用等量试液(6)调整分光光度计的零点。测出试液吸光度后，
在标准曲线上查出对应的淀粉含量。
8　分析结果的表述
食品中淀粉的含量以质量百分率表示，按下式计算：
C 1 　 　 C
x ＝ ─────── × ───────── ×100 ＝ ──────────
V 2 1000 × 1000　 V 2
m × ── m × ── × 10000
V 1 V 1
式中：x ━━ 样品中淀粉的含量，质量百分率，％；
C ━━ 标准曲线上查出的试液中淀粉含量，μg；
ｍ ━━ 试样的质量，g；
V 1 ━━ 试液的定容体积，mL；
V 2 ━━ 测定时吸取试液的体积，mL。
计算结果精确至小数点后第二位。 
9 允许差
同一样品的两次测定值之差，不得超过两次测定平均值的5.0％。

附录 A (标准的附录)

淀粉葡萄糖苷酶、葡萄糖氧化酶、过氧化物酶的技术要求、试验方法及判定规则

A 1 技术要求
A 1.1 酶活力
淀粉葡萄糖苷酶活力(U／mg) ≥ 2；
葡萄糖氧化酶活力(U／mg) ≥ 20；
过氧化物酶活力(U／mg) ≥ 50。 
A 1.2 干扰酶
淀粉葡萄糖苷酶、葡萄糖氧化酶、过氧化物酶都不得含有纤维素酶、β-果糖苷酶、
半乳糖苷酶和过氧化氢酶。
A 2 试验方法
用微量移液管吸取0.50mL 淀粉标准溶液 (3.6)，置于 10mL 比色管中，加入 100μg
乳糖 (HG3-1000，分析纯)、100μg蔗糖 (HG3-1001，分析纯)和100μg 纤维二糖 (生化
纯)， 再加入1mL淀粉萄葡苷酶试剂溶液(3.2.1)，以下按 7.1 步骤操作。测定吸光度后，
在标准曲线 (7.1) 上查出对应的淀粉含量，按下式计算淀粉的回收率：

C
R ＝ ────── × 100
0.5 × 200

式中：R ━━ 淀粉的回收率，％；
C ━━ 淀粉的实测值，μg。
A 3 判定规则
测得淀粉的回收率，如在95％～105％范围内，则判定淀粉葡萄糖苷酶、葡萄糖氧化
酶和过氧化物酶符合技术要求。



━━━━━━━━━━━━━━

━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━
国家技术监督局1996－04－10批准 1996－12－01实施