中华人民共和国进出口商品检验行业标准 中华人民共和国进出口商品检验行业标准

出口禽肉中二氯二甲吡啶酚残留量检验方法 SN/T 0212.1?93
液 相 色 谱 法 

Method for determination of clopidol
residues in poultry meat for expotr
?Liquid chromatography
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1 主题内容与适用范围
本标准规定了出口禽肉中二氯二甲吡啶酚残留量检验的抽样、制样和液相色谱测定方
法。
本标准适用于出口冻鸡中二氯二甲吡啶酚残留量的检验。

2 抽样和制样
2.1 检验批
以不超过 2 500件商品为一检验批。
同一检验批的商品应具有相同特征，如：包装、标记、产地、规格和等级等。
2.2 抽样数量
批量(件) 最低抽样数(件)
1～25 1
26～100 5
101～250 10
251～500 15
501～1 000 17
1 001～2 500 20
2.3 抽样方法
按2.2规定的抽样件数，随机抽取，逐件开启。每件至少取一袋作为原始样品，总量
不少于 2 kg，放入清洁容器内，加封后，标明标记，及时送实验室。
2.4 试样制备
从每袋原始样品中取出部分有代表性样品，将可食部分放入高速组织捣碎机中捣碎均
匀，充分混匀，用四分法缩分出不少于500 g，装入清洁的容器内，加封后，标明标记。
2.5 试样保存
将试样于－18℃冷冻保存。
注：在抽样及制样过程中，必须防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。

3 测定方法
3.1 方法提要
用乙腈提取试样中二氯二甲吡啶酚，经氧化铝柱、阴离子交换柱净化，用带紫外检测
器的液相色谱仪测定二氯二甲吡啶酚残留量，外标法定量。
3.2 试剂和材料
除特别说明外，所有试剂均为分析纯，水为二次重蒸馏水。
3.2.1 乙腈：紫外光谱纯。 
3.2.2 甲醇：紫外光谱纯。
3.2.3 乙酸钠水溶液：100 g/L。
3.2.4 乙酸甲醇溶液：0.25％(V/V)。
3.2.5 乙酸甲醇溶液：0.5％(V/V)。
3.2.6 饱和硝酸银丙酮溶液。
3.2.7 无水硫酸钠：650℃灼烧4 h，贮于密封瓶中。
3.2.8 氧化铝：层析用，中性，70～230目。
3.2.9 阴离子交换树脂：Dowex 1-X8,100～200目，氯离子型。使用前按下列方法转换成
乙酸根型：将100 g Dowex 1-X8树脂浸入10％乙酸钠水溶液中，不时搅拌，浸泡 2 h后,
倾入布氏漏斗中，用500 mL10％乙酸钠水溶液淋洗至仅存痕量氯离子(用饱和硝酸银丙酮
溶液检验，呈微混浊)，再用水淋洗至无氯离子，再依次用200 mL下列溶液淋洗：甲醇、
0.25％ 乙酸甲醇溶液(3.2.5)、甲醇。淋洗后，贮存于试剂瓶中，加甲醇浸泡备用。
3.2.10 二氯二甲吡啶酚标准溶液
3.2.10.1 标准贮备液：称取10.0 mg二氯二甲吡啶酚(含量＞99.0％)，用甲醇溶解并
定容至100 mL，即为100 μg/mL 二氯二甲吡啶酚标准贮备液。
3.2.10.2 标准工作溶液：根据需要由标准贮备液用甲醇逐级稀释成适当浓度的标准工
作溶液。
3.3 仪器和设备
3.3.1 高效液相色谱仪并配有下列装置：
a. 紫外检测器；
b. 色谱数据处理机或记录仪。
3.3.2 组织捣碎机。
3.3.3 快速混匀器或匀浆机。
3.3.4 多功能微量化样品处理仪或其他相当的仪器。
3.3.5 氧化铝层析柱：30 cm×1.8 cm (id)，下填玻璃棉塞，柱内装约三分之一甲醇，缓
缓加入15 g氧化铝，用20 mL甲醇预洗柱子。
3.3.6 阴离子树脂交换柱：17 cm×1 cm (id)，下填玻璃棉塞，加入乙酸根型Dowex树脂
悬浮液(3.2.9)，使沉降后高约 2～3 cm，用甲醇洗之，使用前，再依次用20 mL0.5％乙
酸甲醇溶液(3.2.5)和 20 mL甲醇洗涤。
3.3.7 离心机：4 000 r/min。
3.3.8 微量可调移液管：40～200μＬ，200～1 000μＬ。
3.3.9 离心管：50 mL。
3.3.10 微量进样器：20μＬ。
3.3.11 高速离心机：14 000r/min。
3.4 测定步骤
3.4.1 提取及净化
称取约 5 g(精确至0.01g)试样和5g无水硫酸钠于50mL离心管中，加入25mL乙腈，于
快速混匀器或匀浆机上匀浆2min ，在离心机上以 3000r/min 离心 2 min 。将上清液倾
入下接阴离子交换柱的氧化铝柱中，使提取液通过两个净化柱净化。再用20mL乙腈提取
滤渣一次，离心后同样将上清液倾入氧化铝柱中净化。待提取液全部过柱后，用 20 mL 
甲醇淋洗两个柱子，至此，弃去全部淋洗液。取下氧化铝柱，将 25 mL 离心管置于阴离
子交换柱下，用 20 mL 0.5％ 乙酸甲醇溶液( 3.2.5)洗脱二氯二甲吡啶酚。于多功能微
量化样品处理仪上60℃蒸干，以0.50mL甲醇溶解残渣。经高速离心(14000r/min)3min后，
供液相色谱测定。
3.4.2 测定
3.4.2.1 测定色谱条件
a. 色谱柱：十八烷基键合固定相(ODS)色谱柱，
10 μm,25 cm×4.6 mm (id)；
b. 流动相：乙腈－水(20＋80)，流速为 1 mL/min；
c. 检测波长：270 nm；
d. 色谱柱温度：40℃；
e. 进样量：20μL。
3.4.2.2 色谱测定
根据样液中二氯二甲吡啶酚含量情况，选定峰高相近的标准工作溶液。标准工作溶液和
样液中二氯二甲吡啶酚响应值均应在仪器检测线性范围内。对标准工作溶液和样液等体积参插
进样测定，在上述色谱条件下，二氯二甲吡啶酚保留时间约为 5 min。
3.4.3 空白试验
除不加试样外，按上述测定步骤进行。
3.4.4 结果的计算和表述
用色谱数据处理机，或按下式计算二氯二甲吡啶酚残留量：
h?c?V
X=━━━━━
hs?m
式中：X??样品中二氯二甲吡啶酚含量，mg/kg；
h??样液中二氯二甲吡啶酚峰高，mm；
hs??标准工作溶液中二氯二甲吡啶酚峰高，mm；
c??标准工作溶液中二氯二甲吡啶酚浓度，μg/mL；
m??试样量，g；
V??样液最终体积，mL。
注：计算结果需扣除空白值。
4 方法的测定低限和回收率
4.1 测定低限
本方法的测定低限为0.01 mg/kg。
4.2 回收率
回收率实验数据：二氯二甲吡啶酚浓度在0.010～0.100 mg/kg 范围内回收率为
84.1％～106.0％。

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附加说明：
本标准由中华人民共和国国家进出口商品检验局提出。
本标准由中华人民共和国湖南、秦皇岛进出口商品检验局负责起草。
本标准主要起草人袁智能、庞国芳、彭三和、曹彦忠、戴华、范春林、聂洪勇。
主要参考文献：
Canutte A.Mtema,Hiroyuki Nakazawa,and Eigo Takabatake,J.Assoc.Off.Anal.
Chem.,67 (2),224(1984).
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中华人民共和国国家进出口商品检验局1993-06-04批准 1993-008-01实施