中华人民共和国家进出口商品检验行业标准 中华人民共和国家进出口商品检验行业标准

出口粮谷、蔬菜中百草枯残留量检验方法
紫 外 分 光 光 度 法 SN 0340-95

Method for the determination of paraquat residues
in cereals,vegetables for export
?UV-spectrophotometric method
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1 主题内容与适用范围
本标准规定了出口粮谷、蔬菜中百草枯残留量检验的抽样、制样和紫外分光光度测定
方法。
本标准适用于出口大米、白菜中百草枯残留量的检验。

2 抽样和制样
2.1 大米抽样
2.1.1 检验批
以不超过 4 000袋为一检验批。
同一检验批的商品应具有相同的特征，如包装、标记、产地、规格和等级等。
2.1.2 抽样数量
按一批总袋数的平方根抽取：
a=N**1/2……………………………………(1)
式中：a??抽样袋数；
N??全批袋数。
注：a值取整数，小数部分向前进位为整数。
2.1.3 抽样工具
2.1.3.1 单管取样器：不锈钢管，全长55cm(包括手柄)，直径1.5cm，沟槽长度应超过
袋对角线长度的一半。
2.1.3.2 取样铲。
2.1.3.3 分样板。
2.1.3.4 样品筒(袋)：可密封。
2.1.3.5 分样布(分样)。
2.1.4 抽样方法
2.1.4.1 袋内抽样：按 2.1.2 规定计算抽样袋数(扣除倒包抽样袋数)，在堆垛四周上、
中、下各部位以曲线形走向，随机抽取。将扦槽朝下，从每袋一角依斜对角方向插入袋内，
将扦槽朝上旋转180°，抽出扦样器立即倒入盛样容器内。每袋扦取样品数量应基本一致。
2.1.4.2 倒包抽样：从堆垛的各部位随机抽取 2.1.2 规定的应抽样件数的 10％ (每批
不少于 3袋)，将袋口缝线全部拆开，平置于分样布或其他洁净的铺垫物上，双手紧握袋
底两角提起约成 45°倾斜角，倒拖 1m 以上，使袋内货物全部倒出后，用取样铲在各部
位扦取样品约100 g，立即倒入盛样容器内。
2.1.4.3 大样缩分：集中袋内和倒包所取样品，倒于清洁分样布上，使用分样板，按四
分法缩分样品不少于4 kg，加封后，标明标记并及时送实验室。
2.1.5 试样制备
将样品缩分至1 kg ，全部磨碎，通过 20目筛，混匀，均分成两份，装入洁净容器内，
标明标记。
2.1.6 试样保存
将试样于-5℃以下避光保存。
2.2 蔬菜抽样
2.2.1 检验批
以不超过1 000件为一个检验批。
同一检验批内商品应具有同一特征，如包装、标记、产地、规格、等级等。
2.2.2 抽样数量 
批量，件 最低抽样数，件
1～25 1
26～100 5
101～250 10
251～1 000 15
2.2.3 抽样工具
2.2.3.1 取样刀：不锈钢菜刀。
2.2.3.2 样品袋：聚乙烯塑料食品袋。
2.2.4 抽样方法
按2.2.2 规定的抽样件数,在不同部位随机抽取,逐件开启。每件抽取样品不少于500g
为原始样品，原始样品总量不得少于 2 kg ，将所取样品装入样品袋内，加封后，标明标
记，及时送实验室。
2.2.5 试样制备
将所取原始样品混匀，取可食部分，切碎，按四分法缩分出500g ，经组织匀浆机匀
浆成均匀的样品，均分成两份，装入洁净的广口瓶中，密封，标明标记，作为实验室样品。
对于不易均匀的菜类样品，先将缩分过的样品切碎精确称重。然后将切碎的样品倒入
组织匀浆机内，按样品重量的20％(m/m) 加入蒸馏水，匀浆。注意：后加入的水分在称样
时要扣除。上述操作的每一步都应详细记录。
2.2.6 试样保存
将试样于 -18℃冷冻保存，备用。
注：在抽样和制样的操作过程中，必须防止样品受到污染或发生残留物含量变化。
3 测定方法
3.1 方法提要
试样中百草枯用硫酸溶液煮沸回流加以提取，提取液经阳离子交换树脂柱净化，百草枯
被吸附在树脂上，然后，以饱和氯化铵溶液洗脱。于流出液中加入连二亚硫酸钠溶液，百草
枯被还原为蓝色化合物，用紫外分光光度计进行定量。
3.2 试剂和材料
除特殊规定外，试剂为分析纯，水为蒸馏水或相应的去离子水。
3.2.1 硫酸(比重 1.84)。
3.2.2 氢氧化钠。
3.2.3 氯化钠。
3.2.4 盐酸(比重1.18)。
3.2.5 氯化铵。
3.2.6 乙二胺四乙酸二钠(EDTA)。
3.2.7 苯。
3.2.8 连二亚硫酸钠。
3.2.9 硫酸溶液： 9 mol/L。
3.2.10 盐酸溶液： 2 mol/L。
3.2.11 氢氧化钠溶液： 12.5 mol/L。
3.2.12 氢氧化钠溶液：10 mol/L。
3.2.13 氢氧化钠溶液： 0.3 mol/L。
3.2.14 饱和氯化钠溶液：溶解360 g 氯化钠于 1 L水中，搅拌溶解，澄清备用。
3.2.15 饱和氯化铵溶液：溶解370 g 氯化铵于 1 L水中，搅拌溶解，过滤备用。
3.2.16 稀氯化铵溶液：1/10 饱和溶液。量取1份饱和氯化铵溶液加入 9份水，混匀。
3.2.17 连二亚硫酸钠溶液：0.2％ 于 0.3 mol/L 氢氧化钠溶液中。溶解0.20 g连二亚
硫酸钠于少量 0.3 mol/L的氢氧化钠溶液中，于棕色容量瓶内以该氢氧化钠溶液定容至
100mL ，混匀。此溶液必须在临使用前新鲜配制，超过1.5 h后不宜使用。
3.2.18 离子交换树脂：AG 50WX-8,100～200目，在水中浸泡。
3.2.19 百草枯标准品：百草枯二氯化物含量大于99％。
3.2.20 百草枯标准溶液:准确溶解0.0250±0.0001 g 百草枯标准品于少量饱和氯化铵
溶液中,转移至250 mL棕色容量瓶中并以饱和氯化铵溶液准确定溶,摇匀,作为标准贮备
液,此溶液百草枯二氯化物的浓度为 100μg/mL。根据需要再配成适用浓度的标准工作
液。 
3.3 仪器和设备
3.3.1 紫外分光光度计：具有连续波长与吸收扫描功能，配备 5 cm比色皿。
3.3.2 粮谷粉碎机：筛板孔径1 mm。
3.3.3 组织匀浆机。 
3.3.4 减压抽滤装置：配备1 000 mL 抽滤瓶及φ 10 cm平底漏斗。
3.3.5 加热回流装置：1000 mL 圆底烧瓶及配套的球形冷凝管。
3.3.6 净化柱：50ml酸式滴定管。在玻璃柱的下部塞入一小团玻璃棉，高度约0.5～1cm，
垂直固定好柱子，加入10 mL 在水中浸泡并沉降的树脂,分别用50 mL饱和氯化钠溶液和
50 mL水洗柱。注意保持液面略高于树脂层。每个试样测定均须使用一根新制备的柱子。
3.4 测定步骤
3.4.1 提取
称取粮谷试样约 50.0 g或蔬菜试样 200.0g(精确至0.1g)置于1000mL圆底烧瓶中，根据
试样的含水量加入适量的水和 9 mol/L 的硫酸溶液，使瓶内溶液的总体积约为200～300mL
(包括试样的含水量)、硫酸的浓度为2.5mol/L。加入数粒小玻璃珠，连接回流冷凝管。加
热至沸(如产生大量气泡可加入几滴正辛醇)并使之回流 5 h以上。取下烧瓶，冷却，加入
500 mL水。将提取液倒入已铺垫好双层快速滤纸(含油试样可多垫几层滤纸)的平底漏斗上，
用抽滤装置过滤，用少量水分数次洗涤。对非油类试样，将滤液倒入 1 000 mL的烧杯中。
对含油试样可将滤液倒入 1 000 mL分液漏斗中，然后用 100 mL 苯分三次萃取，收集水相
于1000 mL烧杯中。于烧杯中的溶液中加入 12.5 mol/L 的氢氧化钠溶液，其体积相当于回
流前所加 9 mol/L硫酸溶液的量，加入 5g EDTA，搅拌至完全溶解，加水至溶液总体积约
900 mL ，然后再用 10 mol/L 的氢氧化钠溶液调节 pH至 9 。冷却至室温，将溶液全部
倒入 1 000 mL的分液漏斗中备用。
3.4.2 净化和洗脱
3.4.2.1 净化
将盛有提取液的分液漏斗固定在净化柱的上方(可用洁净的胶管将二者连接)，调节
活塞，使溶液以 10～12 mL/min的速度过柱。过柱后移开分液漏斗。然后以 5 mL/min的
速度依次用 50 mL水、50 mL 2mol/L的盐酸溶液、 50 mL水和 50mL稀氯化铵溶液淋洗柱
子，弃去所有流出液。
3.4.2.2 洗脱
将上述处理后的柱子用饱和氯化铵溶液洗脱柱上百草枯，洗脱速度为 0.5～1mL/min，
收集50 mL洗脱液于 50 mL容量瓶中。
注：洗脱时柱温(环境温度)不应低于 20℃。
3.4.3 测定
3.4.3.1 测定波长的选择
吸取 10 mL含百草枯二氯化物为 1.0μg/mL的百草枯标准工作液于 50 mL比色管中，
加入 2 mL连二亚硫酸钠溶液，摇匀后立即倒入 5 cm比色皿中，置于紫外分光光度计比色
皿中进行测定，设定波长从 410至 380 nm 进行吸光度扫描，选择最大吸收峰处为测定波
长λm，然后分别选择 λm±4 nm处为校正波长λh和λ1。
3.4.3.2 工作曲线的绘制
分别吸取百草枯标准贮备溶液 0.00 mL、0.05 mL、0.10 mL、0.25 mL、0.50 mL、
0.75 mL、1.00 mL 和 1.50 mL于 8只100 mL容量瓶中，各加入饱和氯化铵溶液至刻度。此
工作液百草枯的浓度分别为 0.00 μg/mL、0.05 μg/mL、0.10 μg/mL、0.25 μg/mL、
0.50μg/mL、0.75 μg/mL、1.00μg/mL和1.50μg/mL。分别吸取上述工作液10mL于8支50
mL比色管中，各加入 2 mL连二亚硫酸钠溶液，混匀后立即用紫外分光光度计，在λm处以
空白液对照测定各工作液的吸光度，以吸光度为纵坐标，相应浓度为横坐标绘制标准曲线。
同时于λh和λ1处(与空白液对照)分别测定 1.00μg/mL百草枯工作液的吸光度。
3.4.3.3 样品测定
吸取 10 mL洗脱液于 50 mL比色管中，加入 2 mL连二亚硫酸钠溶液，混匀后立即于
λm、λh 和λ1处以空白液对照分别测定吸光度。 
3.4.4 空白试验
除不称取样品外，按上述测定步骤进行。
3.5 结果计算和表述
按下式计算试样中百草枯(以百草枯二氯化物计)的残留量：
c?V
X＝────…………………………………(2) 
m
式中： X? 试样中百草枯二氯化物的残留量，mg/kg；
C?从标准曲线中以样品的校正吸光度值(A校)查出对应的百草枯二氯化物的浓
度，μg/mL；
v?洗脱液最终定容体积，mL；
m? 称取的试样量，g。 
试样的校正吸光度值按下式计算：
p
A
m 
A校＝──────────-［2Am－(Ah＋A1)］………………(3)
p p p
2A －(A ＋ A )
m h 1
式中： A校─?试样的校正吸光度；
p
A ─?λm处百草枯二氯化物浓度为 1 μg/mL时测得的吸光度；
m
p
A ─?λh处百草枯二氯化物浓度为 1 μg/mL时测得的吸光度；
h
p
A ─?λ1处百草枯二氯化物浓度为 1 μg/mL时测得的吸光度；
1 
Am─?λm处测得试样的吸光度；
Ah─?λh处测得试样的吸光度。
A1─?λ1处测得试样的吸光度。
注：计算结果需扣除空白值。

4 方法的测定低限、回收率

4.1 测定低限
本方法测定低限为 0.02 mg/kg。
4.2 回收率
回收率实验数据，百草枯添加浓度在 0.02～10 mg/kg范围内，回收率为 70.2％～
108.0％。

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附加说明：
本标准由中华人民共和国国家进出口商品检验局提出。
本标准由中华人民共和国海南进出口商品检验局负责起草。
本标准主要起草人欧伟、陈如娅、卓海华、张惠。
主要参考文献：
FDA-Pesticide Analytical Manual, Vol.Ⅱ, Pesticide Reg, Sec.180.205,1985.
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中华人民共和国国家进出口商品检验局 1995-05-29批准 1995-11-01实施