中华人民共和国进出口商品检验行业标准 中华人民共和国进出口商品检验行业标准
出 口 食 品 中 大 肠 杆 菌
(葡萄糖苷酶荧光)检验方法 SN 0333?94
Method for inspection of Escherichia coli in food for export
?Fluorescence measurement of glucosidase
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1 主题内容与适用范围
本标准规定了食品中大肠杆菌的定量检验方法。
本标准适用于出口食品(不包括贝类)卫生质量的监视和出口前的筛选检验。
2 引用标准
SN 0169 出口食品中大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌检验方法
3 设备和材料
3.1 吸管: 1 mL和 10 mL,带刻度。
3.2 试管:16 mm×160 mm。
3.3 稀释瓶:500 mL三角瓶或广口瓶。
3.4 玻璃珠。
3.5 均质器。
3.6 水浴箱或培养箱:36±1℃。
3.7 长波紫外光灯:366 nm,功率 <6W。
4 培养基和试剂
4.1 LST-MUG肉汤:见 A1。
4.2 Columbia-MUG 琼脂培养基:见A2。
4.3 生理盐水:见 A3。
5 样品制备
按照 SN 0169 第4章进行。
6 测定
6.1 每个样品选三个连续稀释倍数的稀释液,每个稀释倍数的稀释液接种三管 LST-MUG
肉汤,每管1mL。
6.2 将接种管于30 min 内放入36±1 ℃ 水浴或培养箱内,培养24±2h。
6.3 将各管培养物拿至暗室,在长波紫外光灯照射下观察。凡显蓝色荧光的为大肠杆菌阳
性。在阳性管上做好标记并记录。
6.4 从产气而不显荧光的各管取培养物,划线接种Columbia-MUG 琼脂平板,36±1℃培养
24±2 h。
6.5 将培养后的 Columbia-MUG平板拿至暗室,打开皿盖,在长波紫外光灯照射下观察有
无蓝色荧光。凡显蓝色荧光的,无论其面积大小,均记为原 LST-MUG 管培养物为大肠杆
菌阳性。
7 结果的报告
按LST-MUG 管和 Columbia-MUG琼脂平板的大肠杆菌阳性数,查 MPN表,报告每克(毫
升)样品中大肠杆菌的 MPN值。
附 录 A
培养基和试剂
(补充件)
A1 LST-MUG肉汤
胰蛋白(月示)或胰酪胨 20.0g
氯化钠 5.0g
乳糖 5.0g
磷酸氢二钾 2.75g
磷酸二氢钾 2.75g
月桂基硫酸钠 0.1g
MUG 0.1g
蒸馏水 1000mL
将各成分溶于蒸馏水中,分装试管(内装倒立小发酵管),每管 10 mL。121℃ 高压灭
菌15 min。最终 pH6.8±0.2。
A2 Columbia-MUG琼脂培养基
胰酪胨 13.0g
水解蛋白 6.0g
酵母浸膏 3.0g
牛肉浸膏 3.0g
可溶性淀粉 1.0g
氯化钠 5.0g
琼脂 13.0g
蒸馏水 1000mL
将各成分溶于水中,无须调pH值121℃ 高压灭菌15 min 。冷却至55~60℃,倾注
平板。
A3 生理盐水
氯化钠 8.5g
蒸馏水 1000mL
分装于三角瓶或广口瓶,每瓶225 mL。 121℃高压灭菌 15 min。
附加说明:
本标准由中华人民共和国国家进出口商品检验局提出。
本标准由中华人民共和国内蒙古进出口商品检验局负责起草。
本标准主要起草人甄宏太、刘中学、周云霞、苏庆。
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中华人民共和国国家进出口商品检验局1994-12-26批准 1995-05-01实施