中华人民共和国进出口商品检验行业标准 中华人民共和国进出口商品检验行业标准

出口禽肉中二氯二甲吡啶酚残留量检验方法
乙酰化-气相色谱法 SN 0283-93
Method for the determination of clopidol
residues in poultry meat for export
?Acetylation-gas chromatography
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1　主题内容与适用范围
本标准规定了出口禽肉中二氯二甲吡啶酚残留量检验的抽样、制样和气相色谱测定方
法。
本标准适用于出口冻鸡中二氯二甲吡啶酚残留量的检验。
2　抽样和制样
2.1　检验批
以不超过2500件为一检验批。
同?检验批的商品应具有相同的特征,如包装、标记、产地、规格和等级等。
2.2　抽样数量
批量,件　　　　　 最低抽样数,件
1～25　　　　　　　　　　　 1
26～100　　　　　　　　　　　 5
101～250 10
251～500 15
501～1000 17
1001～2500 20
2.3　抽样方法
按2.2规定的抽样件数随机抽取,逐件开启。每件至少取500g或一袋作为原始样品,原
始样品总量不得少于2kg。放入清洁容器内,加封后,标明标记,及时送实验室。
2.4　试样制备
将所取原始样品缩分出1 kg,取可食部分,经组织捣碎机捣碎均匀,均分成两份,装
入洁净容器内,作为试样。密封,并标明标记。
2.5　试样保存
将试样于-18℃以下冷冻保存。
注：在抽样和制样的操作过程中,必须防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。
3　测定方法
3.1　方法提要
用甲醇提取样品中二氯二甲吡啶酚,经氧化铝和阴离子交换树脂柱净化。与乙酸酐反
应,转化成相应的酯,用气相色谱电子俘获检测器测定,内标法定量。
3.2　试剂和材料
3.2.1　甲醇：分析纯,经全玻璃装置重蒸馏,收集64～65℃馏分。
3.2.2 正己烷：分析纯,经全玻璃装置重蒸馏,收集67～69℃馏分。
3.2.3　无水硫酸钠：分析纯,经650℃灼烧4h,置于干燥器内备用。
3.2.4　氧化铝：中性,净化用,100～200目；300℃灼烧4 h,置于干燥器备用。
3.2.5　阴离子交换树脂：Dowex 1-x8 100～200目,Cl型。
3.2.6　助滤剂：Celite 545,使用前用甲醇清洗。
3.2.7 乙酸酐：分析纯,重蒸馏。
3.2.8　吡啶：色谱纯。
3.2.9　苯：分析纯。
3.2.10 氢氧化钠：分析纯。
3.2.11 氢氧化钠溶液：1mol/L。取40.0 g氢氧化钠溶解于1000 mL去离子水中。
3.2.12　乙酸钠：分析纯。
3.2.13　乙酸钠溶液：0.5mol/L。溶解68.0g乙酸钠于1000 mL去离子水中。
3.2.14 四硼酸钠：分析纯。
3.2.15 四硼酸钠溶液：0.1mol/L。取38.1g四硼酸钠溶于1000 mL去离子水中。
3.2.16 冰乙酸：分析纯。
3.2.17　乙酸-甲醇溶液: 0.5％。将2.5mL冰乙酸加到477.5mL甲醇中。
3.2.18 硫酸钠溶液：2％。取2g硫酸钠溶解于100 mL去离子水中。
3.2.19 二氯二甲吡啶酚和六氯苯标准品：纯度≥99％。
3.2.20 二氯二甲吡啶酚标准溶液：准确称取适量的二氯二甲吡啶酚标准品,用甲醇配成
浓度为100μg/mL的标准储备溶液,根据需要再配成适当浓度的标准工作溶液。
3.2.21 内标溶液：准确称取适量的六氯苯标准品,用苯配成浓度为100 μg/mL的标准储
备溶液,根据需要再用正己烷配成适当浓度的内标工作溶液。
3.3　仪器和设备
3.3.1　气相色谱仪,配有电子俘获检测器。
3.3.2　组织捣碎机。
3.3.3　均质器。
3.3.4　离心机。
3.3.5　离心管：具磨口塞,5mL。
3.3.6　氧化铝柱：20cm×20mm(id)玻璃柱,柱底部填约0.5cm高的脱脂棉,装8～9cm高的
氧化铝。用前经甲醇淋洗。
3.3.7　阴离子交换树脂柱：15 cm×10 mm (id)玻璃柱,将阴离子交换树脂伴以去离子水
装入柱内,高度为2cm,注入100mL氢氧化钠溶液(3.2.10)淋洗,然后用去离子水洗涤至中
性。再用100 mL乙酸钠溶液(3.2.12)淋洗,用去离子水洗涤至中性。最后用50mL甲醇水溶
液80％(V/V)洗涤后备用(流速为2mL/min)。
3.3.8　微量注射器：10μL、100μL。
3.4　测定步骤
3.4.1　提取
称取试样20g(精确到0.1g)于均质杯中,加入50 mL甲醇和3g助滤剂,高速均质3min。
在布氏漏斗上敷上2 g助滤剂,抽滤均质后的样品,用45mL甲醇分3次洗涤均质杯并移入布
氏漏斗中抽滤。将滤液并入100 mL容量瓶中,用甲醇定容,并混匀。
3.4.2　净化
将阴离子交换柱置于氧化铝柱下,吸取50mL提取液注入氧化铝柱内,控制提取液在阴
离子交换柱的流速为1mL/min,用20mL甲醇冲洗两柱。除去氧化铝柱,弃去全部的流出液。
用20mL乙酸-甲醇溶液(0.5％)洗脱二氯二甲吡啶酚,洗脱液收集于25mL容量瓶中,用甲醇
定容。
3.4.3 乙酰化
吸取5.0 mL洗脱液于离心管中,在50～60℃水浴中,用氮气吹干。加4 mL四硼酸钠溶
液(0.1mol/L)溶解残渣,离心管置于50℃水浴中5min。依次加入1.0mL内标工作溶液(3.2.
21)、10μL吡啶和75μL乙酸酐,加塞,振摇1min,2000r/min离心5min。将正己烷相转入
另一离心管中,加无水硫酸钠脱水后供气相色谱测定。
3.4.4　标准物的乙酰化
取适用浓度的标准工作溶液,用氮气吹干,按3.4.3进行乙酰化反应。
3.4.5　测定
3.4.5.1　色谱条件
a.　色谱柱：玻璃柱,2m×3mm(id),填充物为3％OV-17＋3.3％QF-1涂于Chromosorb
W HP(100～120目);
b． 色谱柱温度：150℃;
c. 进样口温度：220℃;
d． 检测器温度：250℃;
e. 氮气：纯度≥99.99％,65mL/min。
3.4.5.2　色谱测定
分别准确注入5 μL经乙酰化后的样液和标准工作溶液于气相色谱仪中,按3.4.5.1的
条件进行分析。响应值均应在仪器检测的线性范围之内。
在上述色谱条件下,二氯二甲吡啶酚的保留时间约为4.0min,六氯苯约为11 min。
3.4.6　空白试验
除不加试样外,按上述测定步骤进行。
3.5　结果计算和表述
用色谱数据处理机或按下式计算试样中二氯二甲吡啶酚残留含量：
cs?h?hsi?mi
X＝─────────
csi?hi?hs?m
式中：X??试样中二氯二甲吡啶酚残留量,mg/kg；
cs??标准工作溶液中二氯二甲吡啶酚的浓度,μg/mL；
csi??标准工作溶液中六氯苯的浓度,μg/mL；
h??样液中二氯二甲吡啶酚乙酯的峰高,mm；
hi??样液中六氯苯的峰高,mm；
hs??标准工作溶液中二氯二甲吡啶酚乙酯的峰高,mm；
hsi??标准工作溶液中六氯苯的峰高,mm；
mi??样液中的六氯苯添加量,μg；
m??最终样液所代表的样品重量,g。
注：计算结果需扣除空白值。
4　测定低限、回收率
4.1　测定低限
本方法测定低限为0.005 mg/kg。
4.2　回收率
回收率的实验数据：二氯二甲吡啶酚添加浓度在0.005～0.050 mg/kg范围内,回收率
为：77.0％～100.0％。

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附加说明：
本标准由中华人民共和国进出口商品检验局提出。
本标准由中华人民共和国浙江进出口商品检验局负责起草。
本标准主要起草人郑自强、杨建民、徐亮。
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中华人民共和国国家进出口商品检验局1993-12-28批准 1994-05-01实施